斐林试剂为什么要现配现用

斐林试剂为什么要现配现用

变质太快

斐林试剂要现配现用的原因为:变质太快。斐林试剂的成分之一,酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀,因此斐林试剂一般为现用现配。斐林试剂,是由含量为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和含量为0.05g/mL的硫酸铜溶液、含量为0.2g/mL的酒石酸钾钠配制而成的溶液。常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在。斐林试剂与单糖中的还原性糖(葡萄糖、果糖等)反应生成砖红色沉淀。

斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林(Hermann vonFehling,1812年--1885年)在1849年发明的。

斐林试剂是二价铜离子的酒石酸钾钠配合物,可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧化亚铜。斐林试剂为深蓝色溶液, 在与脂肪醛或还原性糖共热时, 蓝色消失,析出红色的氧化亚铜沉淀。在氧化亚铜析出过程中, 反应液的颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→红色沉淀的逐渐变化,反应较快时,直接观察到红色沉淀。

配制斐林试剂的操作步骤(仅供参考)

1. 配制Fehling's solution工作液:临用前,取适量试剂 (A)、试剂(B)等量混合,即为Fehling's solution工作液,即配即用。

2. 向试管中加入 2ml 待测样品。

3. 向试管中加入1mlFehling's solution工作液,充分摇匀。

4. 把上述混合液置于50~65℃水浴中,并持续2~3min。

5. 观察试管内混合液颜色是否发生变化。其颜色变化顺序应为浅蓝色--棕色--砖红色(沉淀)。

染色结果

还原性糖(如核糖、葡萄糖、果糖等) 砖红色沉淀

非还原性糖(蔗糖、淀粉等) 无颜色变化

注意事项

1. 如是糖尿病人,检验前两三天最好停止服药。

2. 本试剂仅用于科研用途,不宜用于临床检测。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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